案例应用丨WOLF对抗体分泌型CHO细胞进行单克隆分选

发布日期:2025-05-21



在达到商业制造阶段之前,治疗性抗体的发现和开发过程可以持续10年以上。从发现阶段过渡到临床前表征和制造需要开发稳定、高产的单克隆细胞系。使用传统技术(例如有限稀释)分离单个产生抗体的克隆非常耗时,而且浪费耗材和试剂,会产生41%〜77%的空孔,而剩余的孔中也只有25%〜43%能够长成单克隆。细胞打印机可以改善低分配效率,但是,它们仍然缺乏精确分选产生蛋白质的活靶细胞的能力。


WOLF单细胞柔性分选系统能够基于散射光和荧光标记分析和分选单个细胞,这些标记指示了蛋白质或特异性抗体的分泌和活力。与WOLF配合使用的N1单细胞分配器可以将单细胞打入96孔或384孔板中,分选效率高于90%。专利微流控低压(<2 psi)分选技术确保了温和的分选,不会干扰细胞的分泌活动,保留了细胞活性。WOLF的体型很小,只有2立方英尺,可以很容易地放入生物安全柜中,确保整个工作流程无菌。可抛弃式分选芯片集成了所有管路,样本间无任何共用管路,确保工作流程完全没有交叉污染。


在WOLF上分析并分选抗体分泌细胞:通过SytoxGreen阳性染色从100%转染的人群中去除死细胞,其中92.9%为PE阳性抗IgG+的活细胞(下图)。


从分选结果来看,在每个平板中产生抗体的克隆占单细胞长成孔的73%,73%,63%和71%(下图左)并从不同转染混合物中分选的单细胞产生高产克隆(下图右)。



WOLF能够准确地检测和分选样本中的抗体分泌细胞,并且单克隆生长和抗体分泌滴度水平非常高。这种方法可以加速抗体生产过程中新转染产生的高产克隆稳定细胞系的发展。WOLF的荧光激活细胞分选能力,温和的压力和无菌微流控分选原理,使其成为加速治疗性抗体工作流程的有力工具。

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