WOLF助力提高HEK293T单克隆的增殖能力

发布日期:2025-12-11

由于源自人类细胞,HEK293T细胞系在生物治疗蛋白质生产中的应用日益广泛,但转染后常变得极为脆弱。WOLF细胞分选仪与N1单细胞分配器提供了一套温和的分选平台,可高效分选并分装单个转染细胞,从而实现高产、靶向的单克隆细胞生长与生产。


有限稀释法或低通量分选技术及细胞打印机无法筛选转染细胞群体,且部分方法可能对细胞造成损伤。传统流式细胞分选仪虽能解决部分问题,但其高压分选机制对细胞同样具有损伤性,可能限制细胞生长增殖。本文将展示WOLF和N1系统可成功分选GFP转染的HEK293T细胞,实现高生长率,且无需特殊耗材或培养条件。


使用WOLF将GFP阳性的HEK293T细胞分选至96和384孔板中年,随后将分选后的细胞置于37℃、5% CO₂的培养箱中静置培养。第14天使用成像系统进行拍照,并计数GFP阳性克隆(下图)。



WOLF系统无需专用培养基、培养板或特殊生长条件,即可在两种培养板中产生>70%的单克隆HEK293T GFP+菌落。平均而言,96孔板中有78%、384孔板中有74%含有GFP+菌落(左下图)。其中96%的96孔板菌落和97%的384孔板菌落为单克隆(右下图)。



WOLF柔性单细胞分选仪分选效果显著超越了有限稀释法的预期效果。其产生的HEK293T-GFP单克隆长成率远超无专用培养基细胞打印机<10%的标准值。传统流式细胞分选仪虽能富集GFP+细胞,尽管所用的是稳定的HEK293T细胞系,但因其高压力的苛刻分选条件,最终结果可能与细胞打印机相似。


综上所述,WOLF柔性单细胞分选仪是开发敏感转染HEK细胞系的理想平台。