中性粒细胞在慢性炎症中起着关键作用，并与急性感染的抗菌功能有关。循环中性粒细胞的半衰期估计在13-191小时之间，如果被激活，它们可能会更快地衰亡。传统FACS（流式细胞分选）的剪切力和压力对这些寿命短、敏感的细胞来说过于苛刻。因此，科学家们更倾向于使用磁珠和离心梯度来分离中性粒细胞。然而，这些方法缺乏选择存活细胞或更具体的多个标记的能力。例如，常见的中性粒细胞标志物CD16和CD66b将包括一些低表达的脱靶细胞，如单核细胞。因此，CD14和另一种中性粒细胞阴性标志物（如CD49d）的互补阴性选择是非常必要的。NanoCellect的WOLF细胞分选仪允许这种多参数检测和分选，类似于传统的FACS，不同的式，WOLF单细胞柔性分选系统的微流控分选机制使用的压力要低得多（<2 psi），这让我们可以更温和的分选得到更健康活率更高的细胞。
在本文中，我们验证了这款易于使用的WOLF单细胞柔性分选系统对高纯度的中性粒细胞进行分选的能力。
全血细胞经染色后分析，检测中性粒细胞阴性标记物CD49d和CD14，以及中性粒细胞阳性标记物CD16和CD66b。通过SytoxGreen细胞活力染料排除死亡细胞后分选，活中性粒细胞纯度从31.84%（下图左）提升至97.21%（下图右），增幅超过三倍。
分选后的细胞仅有1.40%的细胞保持FL1阳性（AF488/SytoxGreen），纯度通过CD49d/CD14/SytoxGreen染色得到验证，表明分选不仅减少了非中性粒细胞，且未导致死细胞显著增加。通过散射特性进一步验证纯度：中性粒细胞门内纯度从35.49%（下图左）提升至95.25%（下图右）。
综上所述，WOLF单细胞柔性分选系统能够以非常低的压力分选中性粒细胞，并且在标记的配合下可以做到高纯度和高活率分选，足以证实使用WOLF单细胞柔性分选系统是一种高效的中性粒细胞分选方法。这些结果表明，这项新型微流控细胞分选技术可用于研究中性粒细胞的新兴功能、作用机制以及基于细胞的新型治疗方法。
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