基于 T 细胞的免疫疗法需要获取大量的 T 细胞。从患者体内分离出的 T 细胞需要在体外进行激活和扩增处理，然后重新注入患者体内以对抗癌细胞。本研究旨在通过引入一种新型细胞培养方法来提高 96 孔板中人类 T 细胞的激活水平。研究结果表明，C.BIRD 细胞培养方法提高了人类 T 细胞的激活水平，但未引起不良激活反应。
本研究展示了通过加速工艺开发流程来改进基于 T 细胞的免疫疗法研究的巨大潜力。
免疫细胞疗法（也称为细胞免疫疗法）是一种利用患者自身免疫细胞来消灭癌细胞的癌症治疗方法。基于 T 细胞的疗法是当今主流的免疫疗法。T 细胞疗法有多种类型，例如肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）疗法、工程化 T 细胞受体（TCR）疗法以及嵌合抗原受体（CAR）T 细胞疗法。所有这些 T 细胞疗法都需要将大量的 T 细胞重新注入患者体内。因此，通过有或无基因工程的方式扩增分离出的 T 细胞数量是 T 细胞疗法的关键所在。相应地，T 细胞激活是研究或制造基于 T 细胞的疗法的关键步骤，这涉及到基因编辑和非克隆性扩增。有效激活 T 细胞可能会加快基于 T 细胞的细胞疗法的工作流程并缩短开发时间。
先前的数据表明，C.BIRD 微生物反应器可以通过连续搅拌模式改善 Jurkat 细胞（一种人类 T 细胞系）的生长。为了加强 T 细胞扩增工作流程，对 C.BIRD 培养系统中的 T 细胞激活水平进行了测试。我们在 C.BIRD 96 孔培养系统中激活了 Jurkat 细胞系，并发现温和搅拌模式相较于标准静态培养能够提高 T 细胞的激活水平。结果表明，这种模式对于人类 T 细胞的激活而言是理想的，也为基于 T 细胞的细胞疗法的工艺开发提供了一种更有效的方式。
人类 T 细胞激活实验的设计如图 1 所示。在激活过程中，人类 T 细胞会形成聚集体并开始增殖。我们观察了 Dynabeads 人 T 激活剂 CD3/CD28 处理 24 小时后 Jurkat 细胞的形态（图 2A）。结果显示，随着 CD3/CD28 Dynabeads 与 Jurkat 细胞的比例增加，Jurkat 细胞形成了更大的细胞聚集体。在 C.BIRD 培养中，细胞聚集体比静态培养中的更大。
T 细胞激活的另一个指标是特异性细胞因子的产生，例如白介素 2（IL-2）。我们测量了 CD3/CD28 Dynabeads 处理的 Jurkat 细胞分泌的 IL-2 的表达（图 2B）。在没有 Dynabeads 刺激的静态培养和 C.BIRD 培养之间，IL-2 表达水平没有显著差异（P = 0.2943），这表明 C.BIRD 混合培养在没有刺激的情况下不影响 T 细胞激活。在所有 CD3/CD28 Dynabeads 处理的 Jurkat 细胞组中，C.BIRD 培养的 IL-2 表达显著高于静态培养。CD3/CD28 Dynabeads 与 Jurkat 细胞共培养的 IL-2 表达 P 值为：
1:1、3:1 和 5:1 的比例分别为 0.0078、0.0033 和 0.0002。这些结果表明，C.BIRD 培养法能够增强 T 细胞的活化作用。
